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Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus)
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产品介绍

Hifair® Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)基于Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。该酶的热稳定性大幅度提高,可耐受高达50℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。

该预混液包含gDNA digester和2×Hifair® Ⅱ SuperMix plus。gDNA digester可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。2×Hifair® Ⅱ SuperMix plus含有逆转录反应所需的所有组分(Buffer,dNTP,Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase,RNase inhibitor,Random primers/ Oligo (dT)18 primer mix),只需加入RNA模板和 RNase-free ddH2O即可进行逆转录反应,并同时终止gDNA digester的作用,保证cDNA的完整性。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测,针对qPCR进行Random primers/ Oligo (dT)18 primer的比例优化,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始,并具有相同的逆转录效率,最大程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。逆转录产物兼容SYBR® Green和探针法qPCR,可以根据实验目的,选择UNICON® qPCR SYBR® Green Master Mix,Hieff® qPCR SYBR® Green Master Mix或Hieff® qPCR TaqMan Probe Master Mix等试剂配合使用,进行高性能的基因表达分析。

产品特色

重复性好

存储条件

干冰运输。-20℃保存。有效期18个月。

FAQ

Q:逆转录产品如何选择?

A:参考下表。

产品名称/货号产品形式引物适用实验类型产品特点/适用范围(A/B)
Hifair® II Reverse Transcriptase 第二代耐热逆转录酶 11110ES单酶☑cDNA产物后续用于PCR ☑cDNA产物后续用于qPCRA.常规表达丰度RNA逆转录(总RNA 1ng-5μg)
Hifair® III Reverse Transcriptase 第三代耐热逆转录酶 11111ESB.低表达丰度RNA逆转录 (总RNA 10pg-5μg);复杂RNA
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit 11119ES/11121ES酶和Buffer分开单独成管的Oligo dT 、Random primer同A
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit 11139ES同B
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR 11120ES/11123ES酶和Buffer预混按比例预混的Oligo dT 、Random primer☑cDNA产物后续用于qPCR同A
Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR 11137ES/11141ES同B

Q:逆转录引物如何选择?

A:11123ES中使用的是Random Primers和oligo dT按照一定优化的比例预混引物。

Q:反转录产物可以做普通PCR吗?

A:不推荐。11123ES以预混液形式提供,预混液中包含Oligo (dT)与Random Primers混合引物,逆转录产物反转均一,但长度较短,可以做短片段,过长的不适合。若反转录产物后续进行PCR,建议用太阳成集团11121ES,引物选oligo dT。

Q:逆转录产物后续进行qPCR,需要稀释吗?

A:建议稀释5-10倍。目的有二:一、提高稀释倍数,降低移液误差,提高实验重复性;二、降低逆转录体系中高浓度某些成分对下游qPCR反应的抑制作用。

Q:该产品可以搭配其他品牌的定量试剂使用吗?

A:可以。逆转录产物进行稀释后,反转录相关组分对后续不同品牌的qPCR试剂影响非常小。

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