CMFDA，英文全称5-chloromethylfluoresceindiacetate，是一种可自由透过活细胞膜对细胞进行示踪的荧光染料。
CMFDA是二乙酸荧光素（Fluoresceindiacetate，FDA）的氯甲基衍生物，具细胞膜渗透性，不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后，CMFDA中的亲脂性基团可被胞浆内非特异性酯酶水解，生成5-氯甲基荧光素（5-chloromethylfluorescein）；5-氯甲基荧光素可发出绿色荧光，因带电荷而不能自由穿透细胞膜，并利用自身氯甲基与细胞内蛋白和多肽中的谷胱甘肽在谷胱甘肽巯基转移酶作用下生成加合物，能完好的保留在胞内。经CMFDA标记的细胞，荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数天（至少3天），因此非常适用于细胞分化和形态发生等研究。与常用的钙黄绿素和FDA相比，具有较长时间的细胞内信号保留特点。
在细胞分裂增殖过程中，CMFDA标记荧光可分配至两个子代细胞中，且具有不会使邻近细胞染色的功能（有极少情况下通过细胞间缝隙连接发生染色）。同时，CMFDA标记荧光还主要用于分析细胞间融合、细胞粘附及多药耐药转运蛋白的研究。此外，CMFDA还可用于与其他细胞示踪染料联合选择性标记感染细胞内的病原菌；与膜不通透性核荧光探针共同使用，可用于细胞活性研究。
本品具有细胞示踪试剂理想的特性：稳定、无毒（工作浓度范围内）、细胞内荧光保留性好、强荧光（生理pH范围内）。CMFDA标记细胞呈绿色荧光，Ex=492nm，Em=517nm，可与其他颜色荧光染料，如红色荧光蛋白(redfluorescentprotein，RFP）等共染。本品以粉末形式提供，需用DMSO制备储存液后再使用。
| 中文名称（Chinese Synonym） | 5-氯甲基荧光素二醋酸酯 |
| 英文名称（English Synonym） | 5-chloromethylfluorescein diacetate |
| CAS号（CAS NO.） | 136832-63-8 |
| 分子式（Molecular Weight） | C25H17ClO7 |
| 分子量（Molecular Fomular） | 464.85 |
| 外观（Appearance） | 白色或类白色固体 |
| Ex/ Em | 492/517 nm |
| 结构式（Structure） |  |
室温运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。避免反复冻融。
Q：这些探针染细胞，有没有细胞特异性？会不会 293 细胞不好染，MSC 好染？
A：由于这些染料是亲脂性染料，是通过插入到脂质膜中进而被激光激发观察，对于动植物细胞没有
特异性。
Q：这些探针荧光探针装载完多久后观察？
A：为减少各种可能的误差，尽量缩短探针装载后到仪器测定所用的时间(刺激时间除外)。
Q：这些探针染色细胞后，对细胞有毒性吗？
A：荧光探针类产品对活细胞都会有一定的毒性，因此建议在染色处理完成后应尽快完成检测和观察。
Q：为什么染色后发现荧光颜色较浅，应怎么操作进行改进？
A：可以尝试增加染色的时间和浓度。
Q：要看几个小时过程中活细胞的形态变化，应该怎么选？
A：通常使用亲脂性花青染料，如 DiI，DiO，DiD 或 DiR。
Q：染色液工作体积及对应染色细胞数量是否有推荐？
A：请参考对于200,000-1000,000个细胞请使用500ul染色工作液。
[1] Liu C, Hu A, Chen H, et al. The osteogenic niche-targeted arsenic nanoparticles prevent colonization of disseminated breast tumor cells in the bone. Acta Pharm Sin B. 2022;12(1):364-377. doi:10.1016/j.apsb.2021.06.012(IF:11.614)
[2] Wang D, Zhang L, Hu A, et al. Loss of 4.1N in epithelial ovarian cancer results in EMT and matrix-detached cell death resistance. Protein Cell. 2021;12(2):107-127. doi:10.1007/s13238-020-00723-9(IF:10.164)
[3] Yi B, Shen Y, Tang H, Wang X, Li B, Zhang Y. Stiffness of Aligned Fibers Regulates the Phenotypic Expression of Vascular Smooth Muscle Cells. ACS Appl Mater Interfaces. 2019;11(7):6867-6880. doi:10.1021/acsami.9b00293(IF:8.456)
[4] Gao C, Tang F, Gong G, et al. pH-Responsive prodrug nanoparticles based on a sodium alginate derivative for selective co-release of doxorubicin and curcumin into tumor cells. Nanoscale. 2017;9(34):12533-12542. doi:10.1039/c7nr03611f(IF:7.367)
[5] Yan Z, Qu J, Li Z, et al. NEK7 Promotes Pancreatic Cancer Progression And Its Expression Is Correlated With Poor Prognosis. Front Oncol. 2021;11:705797. Published 2021 Jul 6. doi:10.3389/fonc.2021.705797(IF:6.244)
[6] Yan Z, Da Q, Li Z, et al. Inhibition of NEK7 Suppressed Hepatocellular Carcinoma Progression by Mediating Cancer Cell Pyroptosis. Front Oncol. 2022;12:812655. Published 2022 Feb 10. doi:10.3389/fonc.2022.812655(IF:6.244)
[7] Zhao Y, Ding Z, Ge W, et al. Riclinoctaose Attenuates Renal Ischemia-Reperfusion Injury by the Regulation of Macrophage Polarization. Front Pharmacol. 2021;12:745425. Published 2021 Oct 13. doi:10.3389/fphar.2021.745425(IF:5.811)
[8] Yang D, Zhang B, Wang Z, et al. COPS5 negatively regulates goat endometrial function via the ERN1 and mTOR-autophagy pathways during early pregnancy. J Cell Physiol. 2019;234(10):18666-18678. doi:10.1002/jcp.28505(IF:4.522)
[9] Yang D, Jiang T, Liu J, et al. Hormone regulates endometrial function via cooperation of endoplasmic reticulum stress and mTOR-autophagy. J Cell Physiol. 2018;233(9):6644-6659. doi:10.1002/jcp.26315(IF:3.923)
[10] Yang D, Jiang T, Liu J, et al. CREB3 regulatory factor -mTOR-autophagy regulates goat endometrial function during early pregnancy. Biol Reprod. 2018;98(5):713-721. doi:10.1093/biolre/ioy044(IF:3.184)
相关产品
