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2× Hieff Canace® Gold PCR Master Mix 高保真酶预混液
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产品介绍

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液是即用型2×预混合溶液,包含Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系。预混液中添加了Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase的热启动因子,极大提高了扩增的检出率和产物的特异性。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力,扩增目的片段的长度可长达10 kb,该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。扩增速度可达15 sec/kb。适用于复杂模板的扩增,扩增产物为平末端。

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可,并可以通过两步法的程序进行扩增,简化了实验步骤,节省了时间。本产品中不含染料,PCR产物需加入Loading buffer后进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

产品特色
  • 保真性高:Taq酶的52倍,Pfu酶的6倍。
  • 特异性好:目的条带单一。
  • 延伸速度快:可达15 sec/kb,极限速度1 sec/kb。
  • 灵敏度高:可扩增低至1 pg模板。
  • 适用性广:适合不同长度,不同GC含量模板的扩增。
应用案例
  • 高特异性:目的条带单一

图. 5种品牌的高保真DNA聚合酶扩增2 kb,4 kb的小鼠gDNA。Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶与同类产品对比,显示出更高的特异性和产量。Y:Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶;A-E:其他品牌的高保真DNA聚合酶;M:1kb DNA Marker。

  • 延伸速度快:可达15 sec/kb,极限速度达1 sec/kb

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶分别扩增小鼠gDNA 2 kb和水稻gDNA 3 kb片段。不同延伸速度(1-60 sec/kb)都可有效扩增。M:1kb DNA Marker。

  • 灵敏度高:可扩增低至1 pg模板

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶扩增质粒3 kb片段,不同模板量(1 pg-0.5 μg)都可有效扩增。NC:阴性对照。M:1kb DNA Marker。

  • 适用于不同GC含量片段的扩增

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同GC含量(30-70%)片段都可高效率的进行扩增。M:1kb DNA Marker。

  • 适用于不同长度片段的扩增

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同模板、不同长度(1-12 kb)片段都可高效率的进行扩增。M:1kb DNA Marker。模板:1-3:拟南芥gDNA,4-6:水稻gDNA,7-9:小鼠gDNA,10:人cDNA,11-18:人gDNA,19-21:质粒DNA,22:λDNA。

存储条件

冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。

FAQ

Q:Canace 错配率是多少?Canace Gold 是多少?

A:Taq 酶错配率:0.0002,大约 5kb 有一个碱基发生突变。Canace 约 0.000399%, 是 taq 酶的 52 倍。Canace Gold 与 Canace 保真性是一样的。

Q:Canace 具有保真性的原理?

A:具有 3’-5’的核酸外切酶活性,有校正功能。Q:Canace 高 保 真 酶 基 于 什 么 改 造 的 酶 ? A:Pfu 改造的。

Q:Canace 高保真酶是否为热启动高保真酶?

A:暂时不是热启动,后续会有热启动高保真酶。

Q:Canace 扩增后是平末端产物,如何加 A 尾?

A:仅供参考:先对平末端PCR 产物纯化后,浓度要求至少 20ng/ ul(跑胶图像条带清晰,明亮即可),取 14.5 ul PCR 产物,加入 2 ul Taq Buffer,3ul dNTP,0.5 ul Taq酶,在 72℃反应 10~20min, 后直接回收纯化加A 尾的DNA 片段。

Q:Canace 可以用于酵母菌液吗?

A:不建议用。若要用则需通过煮沸,反复冻融,加蜗牛酶等等处理方法破壁后尝试。

Q:Canace 能用于多少长度的片段?

A:验证范围内长度理论上是可以的(验证范围:简单模板 20kb,复杂模板 10kb)。但具体能否扩出,还与模板和引物等有关。

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