人纤连蛋白是一种糖蛋白,在人体细胞粘附、生长、迁移和伤口愈合过程中起着至关重要的作用。它存在于细胞外基质中,并参与各种细胞功能,如细胞分化和胚胎发生。纤连蛋白在介导细胞与其周围环境之间的相互作用中也很重要。
重组人纤连蛋白可作为一种细胞培养基质,替换Matrigel、鼠尾胶原、血源纤连蛋白等,提高细胞贴壁率,增强细胞代谢水平,缩短细胞生长周期。也可直接添加到培养基中,替换或降低血清使用量,促进细胞贴壁、迁移、移动生长、维持细胞状态。
本产品来源于CHO细胞,以冻干粉形式供货,为细胞培养级别,具有批次间差异小、无潜在病毒感染风险等特点。
tyc234cc 太阳成集团提供两种重组人纤连蛋白(FN),92619ES和40113ES,使用效果一致,具体产品区别如下:
产品编号 | 92619ES | 40113ES |
产品名称 | Recombinant Human Fibronectin(CHO,His Tag) 重组人纤维连接蛋白 | Recombinant Human Fibronectin 重组人纤维连接蛋白 |
表达系统 | CHO Cells | 水稻种子 |
内毒素 | <0.5 EU/μg | <0.5 EU/μg |
标签 | His | 无 |
高纯度、高活性、低内毒素、高批间一致性
SDS-PAGE Bioactivity-Cell based assay
使用方法(以6孔板为例,其他培养板加样体积请参考表1)
1.包被/铺板实验
1)取出适量的重组人纤维连接蛋白(rFN),用无菌1×PBS,pH 7.2~7.4稀释至工作液浓度,终浓度参考范围50~100 μg/mL。混匀后,加入到6孔板中,800 μL/孔,保证工作液完全覆盖6孔板底部。
2)将加有rFN工作液的6孔板,放置在4℃过夜或者37 ℃包被1 h。
3)收集6孔板中的工作液,放置4 ℃保存,一周内可用于其他培养瓶/板包被。
4)取出rFN包被后的6孔板,加入正常的细胞培养基后,可直接接种细胞,rFN促进细胞贴壁、生长等。
5)若包被后的6孔板暂不使用,放置在4 ℃密封保存,建议一周内使用完。
【注】: 包被/铺板实验中,重组人纤维连接蛋白(rFN)工作液的加入量,应根据培养皿/瓶的大小进行调整,请参见下表1。
表1不同培养瓶/板包被时推荐 rFN加入量
培养皿 | 底面积 (cm2) | 推荐rFN工作液加入量 |
96孔板 | 0.32 | 50 μL |
24孔板 | 2 | 200 μL |
12孔板 | 4.5 | 400 μL |
6孔板 | 9.6 | 800 μL |
35 mm培养皿 | 8 | 600 μL |
60 mm培养皿 | 21 | 1.6 mL |
25 cm2培养瓶 | 25~28 | 2.0 mL |
2.细胞实验
细胞培养过程中,将rFN直接加入细胞培养基中,可促进细胞贴壁、迁移、维持细胞状态等。终浓度参考范围5~50 μg/mL。
-25 ~ -15℃保存,收到货之后有效期1年。
复溶后,无菌条件下,-85 ~ -65℃保存,3个月有效期。