正常骨髓中存在一定量的储存铁,以含铁血黄素的形式储存于组织巨噬细胞中,可供有核红细胞利用合成血红蛋白,这种存在于红细胞以外的储存铁称为细胞外铁;部分中、晚幼红细胞及少数成熟红细胞也含有铁颗粒,分别称为铁粒幼红细胞及铁粒红细胞,它们属于细胞内铁。
组织学中常使用普鲁士蓝法检测细胞内、外铁,其检测原理是:在酸性条件下亚铁氰化物能与铁离子(三价)结合形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀(也即普鲁士蓝),定位于含铁部位,该法也是诊断学中检测灵敏度极高的一种铁染色方法。
本试剂盒适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞染色。包括脑阔骨髓细胞涂片及血液细胞涂片的染色检查,另配备核固红做复染以区分含铁部位及细胞其他部位。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
| 60533ES20(20 T) | 60533ES60(100 T) | ||
| 60533-A | Fixation Buffer固定剂 | 20 mL | 100 mL |
| 60533-B | Potassium Ferrocyanide Solution亚铁氰化钾溶液 | 20 mL | 100 mL |
| 60533-C | Acid Solution酸性反应液 | 20 mL | 100 mL |
| 60533-D | Nuclear Fast Red solution 核固红溶液 | 20 mL | 100 mL |
使用方法
工作液配制
临用前,取B和C等量混合即为Perls stain,不宜提前配制。
样品染色
(一)石蜡切片染色:
1、组织固定于Fixation Buffer固定剂中,常规脱水包埋。
2、切片厚度4 μm,常规脱蜡至水。
3、蒸馏水水洗1 min。
4、切片入Perls stain (见注意事项3),浸染20~40 min。
5、蒸馏水充分冲洗2~5 min。
6、入核固红染色液,淡染细胞核1~5 min。
7、自来水冲洗1~5 s。
8、常规脱水透明,中性树胶封固.
(二) 冰冻切片染色:
1、无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3 min。
2、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,时间可以相应缩短。
(三)细胞染色:
1、Fixation Buffer固定剂固定10~20 min。
2、自来水冲洗2次,每次2 min。
3、蒸馏水冲洗2次,每次2 min。
4、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤,但操作时间应相应延长。
结果参考
含铁血黄素或三价铁,结果呈蓝色;细胞核、其他组织,结果呈红色。
阴性对照
取相同切片脱蜡至水。入5%草酸孵育2~6 h,经Perls stain,其余步骤同上。结果为阴性。
冰袋运输。4 ℃避光保存。有效期1年。





