MolPure® Plasmid Mini Kit 采用 MolPure® DNA Column P3 和新型的溶液体系,使用常规碱裂解法分离质粒 DNA。提取过程中不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。试剂盒内的 MolPure® DNA Column P3 可 特异性吸附质粒 DNA,不吸附蛋白质、多糖和其它非核酸类物质,具有高效、快速、方便等特点。提取到的质粒 DNA 纯度高, 可直接用于后续酶切、转化、测序等实验。
样本范围广:适用于常规小量质粒提取,单次可提取 2~6 mL 菌液。
DNA纯度高:无蛋白质和RNA污染,可直接用于酶切、转化、测序等实验。
DNA得率高:柱子最大可吸附 60 μg 质粒DNA。
图1:取相同量的菌液进行质粒提取,提取得率:19001>竞品M>竞品F
Part I 组分冰袋运输,-20℃保存;Part II 组分常温运输,室温保存。产品有效期 12 个月。
Q:小提能提多少 ug?
A:起始菌液量 2-6 mL,提取产量 5-35 ug。
Q:质粒小提里面的 RNase A 和 solution1 混合后,说明书建议 4 度存放,放到室温2 天还可以用吗?
A:可以。最好按照标准存放。
Q:质粒小提去蛋白液这一步是不是可以不用吗?还有洗脱液用水行不行?
A:不建议省略去蛋白液;洗脱可以用水。
Q:质粒小提漂洗液含有什么成分?
A:包含 tris,还有其他的不方便透露。
Q: 质粒产量低
A: (1)拷贝数低或者大于10kb的质粒应加大菌体使用量,并按比例增加后续buffer的用量;(2)细菌可能没有充分裂解。
Q: 裂解液有沉淀
A: 裂解液中含有NaOH,可能盐离子析出,可 37℃温浴复溶至溶液澄清再使用。
Q:质粒跑胶出现小于100bp的小条带的原因?
A:可能RNA未去除干净(样本太多或者添加了RNase的缓冲液 RS酶活下降)或者裂解时间太长导致质粒受到破坏。
[1] Zhang C, Liu Y, Zhang T, Lv C, Zang J, Zhao G. Structural comparison between the DNA-protective ability of scallop and shrimp ferritin from iron-induced oxidative damage. Food Chem. 2022;386:132827. doi:10.1016/j.foodchem.2022.132827(IF:7.514)
[2] Hei H, Gao J, Dong J, et al. BK Knockout by TALEN-Mediated Gene Targeting in Osteoblasts: KCNMA1 Determines the Proliferation and Differentiation of Osteoblasts. Mol Cells. 2016;39(7):530-535. doi:10.14348/molcells.2016.0033(IF:2.670)