MolPure® Blood DNAKit 适用于哺乳动物、禽类、鸟类、两栖类等血液样品中DNA的提取。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,配合本公司独特的裂解液配方可以最大限度的回收高纯度DNA。提取的DNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种下游应用实验,如PCR、分子克隆和酶切反应等。
适用性广:可从各类抗凝血、血凝块等样品中提取gDNA。
DNA纯度高:无蛋白质和RNA污染,可直接用于PCR、酶切和文库构建等实验。
快速简便:操作过程1h完成。
安全环保:无需使用酚、氯仿等有机物抽提。
图1:各取100 ul鼠抗凝全血,使用18730和T品牌、O品牌、G品牌同类产品提取gDNA,200 ul ddH2O洗脱。取5 ul电泳。结果显示:18730提取产物产量高。
Part I 组分常温运输,4℃避光保存,有效期12个月。
Part II 组分常温运输,常温保存,有效期12个月。
Q:提取的 DNA 存在降解
A:(1)样本采集与保存降解:
1.应尽可能选择新鲜的样本;
2.样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准;
3.样品保存时要尽可能的避免反复冻融;
(2)样本前处理不当:
1.选择合适的处理方式并进行充分的样本前处理;
2.前处理结束后在样本解冻前添加裂解液;
(3)样本裂解:
1.需对样本进行充分裂解;
2.正确添加所需试剂种类及使用量,样本量增加时裂解液也需成倍增加;
(4)样品保存:
对得到的 DNA 产物进行分装保存,避免反复冻融且保存时间不易太久。
Q:提取的 DNA 产量低
A:(1)样本采集与保存:
1.事先了解提取样本中 DNA 含量水平;
2.样本保存时要尽可能的避免反复冻融,保存时间不宜太久;
3.样本投入量适量,不宜过多或过少;
(2)样本前处理和裂解:
选择合适的前处理及裂解方式(比如延长裂解和沉淀DNA 的时间等),避免堵柱,并尽可能的将样本中的DNA 完全释放出来
(3)提取纯化:
1.使用沉淀法提取DNA 时,可以 1/10 体积的醋酸钠(pH5.2)有助于 DNA 沉淀;
2.在消化液中加入有乙醇后有沉淀析出时,用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量困难;
3.洗脱buffer 中无水乙醇添加量不准确,按照说明书正确添加无水乙醇;
4.添加洗脱液前过度干燥吸附柱:开盖时间不宜超过 5min,否则易造成 DNA 洗脱
5.洗脱液问题:请使用Elution Buffer 洗脱;若用 ddH2O 或其他洗脱液时,确认其
PH 值在 7.0-8.5 之间;
6.洗脱不充分:使用柱式试剂盒对 DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。
Q:提取的 DNA 纯度低,影响下游实验结果
A:样本投入量不要太多;样本应进行充分裂解:不同污染;