本试剂盒在利用液氮充分磨碎植物组织的同时,采用在变性条件下的利用特殊的试剂对植物细胞释放出来的蛋白进行提取,试剂A中含有sodiumorthovanadate,sodiumfluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,有效抑制蛋白酶活性,最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性;而且可以实现植物细胞、组织或原生质体样品总蛋白的提取。
Yeasen开发的本产品,每次可以根据样本与裂解液的推荐体积,实现包括膜蛋白、核蛋白、胞质蛋白以及在植物组织中含有的稀有蛋白在内的全蛋白。分离得到的蛋白组份可应用于SDS-PAGE、WesternBlot、免疫沉淀等。试剂盒的使用次数按照植物组织样本提取的量来确定。
冰袋下运输,建议A组分产品分装保存在-20℃;B组分保存于-20℃,有效期1年。
Q:该产品会导致部分蛋白降解吗?
A:试剂 A 中含有 sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin 等多种抑制剂,有效抑制蛋白酶活性,最大程度地保持所抽提蛋白质的完整性;而且可以实现植物细胞、组织或原生质体样品总蛋白的提取。
Q:提取出来的蛋白可以用于后续 WB 实验吗?
A:可以的。除此之外,分离得到的蛋白组份可应用于 SDS-PAGE、Western Blot、免疫沉淀等。
Q:裂解植物后,产物中出现一小团透明胶状物,这正常吗?
A:植物在裂解后,产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA 等的复合物。在不检测和基因组DNA 结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白, 则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
Q:后续测定蛋白浓度可以使用BCA 吗?
A:可以的。也可采用我公司生产的蛋白质浓度定量试剂盒(20201ES)对提取样品中的蛋白质进行定量。