^{Hieff NGS® Ultima Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina®高通量测序平台专门研发的用于mRNA转录组文库构建试剂盒，本试剂盒将cDNA二链合成与Endprep、dA-tailing进行合并，极大地缩减建库时间。二链合成模块配有两种Buffer，客户可根据需要进行常规建库或链特异性建库。本产品适用于起始模板为10 ng-4 μg不同来源真核生物总RNA样本。经过mRNA分离、片段化、双链cDNA合成、末端修复、加A尾、接头连接和文库扩增，总RNA样品最终转化为适用于Illumina®平台测序的文库。}

试剂盒包含两个独立模块，BOX-I的核心为纯化mRNA所需的oligo (dT)磁珠。BOX-II包含mRNA片段化试剂，反转录试剂，常规和链特异性ds-cDNA合成，以及后续建库所需的所有试剂。其中链特异性二链合成Buffer中将dTTP替换为dUTP，使cDNA第二链中掺入dUTP，而本试剂盒使用的高保真DNA聚合酶无法扩增含尿嘧啶的DNA模板，实现链特异性。提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证，最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

• mRNA建库试剂盒全套试剂，mRNA捕获以及mRNA建库试剂。
• 非预混版本试剂。

Box I：2-8 °C保存；Box II：-25 ~ -15°C保存。

Q：12300、12301、13330、13331  适用于哪些样本？

A：适用于起始模板量为 0.1-4 μg（体积≤50 μL）的高质量动物、植物和真菌等真核生物的总 RNA。

Q：12300、12301、13330、13331 适用于哪些应用？

A：基因表达分析；单核苷酸变异检测；基因融合鉴定；剪切变异体分析Q：12300、12301、13330、13331 试剂盒内包含mRNA capture beads 吗？ A：是的，包含。但是不包含DNA 纯化磁珠。

Q：12300 可以用于 illumina 平台的转录组建库吗？

A：可以的

Q：使用 12300、12301、13330、13331 建库相关的分选纯化磁珠与接头如何选择？

A：磁珠与 DNA 建库试剂盒选择一致。接头用双端短接头(Cat#12414-12415)：双端 384 index；

Q：12300 与 12301 的区别在哪？

A：两者都可以用于 mRNA 常规流程建库与链特异性建库；12301 是最新研发的 mRNA 建库试剂盒， 相比于 12300 建库试剂盒，本试剂盒对一链合成模块，二链合成/末修/加 A 模块和连接模块都做了优化，文库转化率更高。

Q：mRNA 文库构建分为链特异性文库和常规文库，这两个文库的区别是什么？

A：操作：在合成第二条链时常规mRNA 文库加入dTTP,链特异性 mRNA 文库加入dUTP