Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay Kit辉光型萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒
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萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase)是一种分子量约为61kDa的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,能够催化萤光素(luciferin)氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的过程中会发出波长为560 nm左右的生物萤光,该萤光可通过化学发光仪进行测定。检测原理如图所示:

图1:萤火虫萤光素酶检测原理图

Firefly Glo Luciferase Reporter Gene Assay kit是一种辉光型萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒,具有高灵敏度和发光信号稳定的特点,可以满足高通量检测萤光素酶在哺乳动物细胞中的表达。

相对于闪光型Firefly Luciferase Reporter Gene Aassy Kit(Cat#.11401),本品具有以下优点:1)发光信号更稳定性,为实验设计提供了更大的灵活性。2)采用加样-混匀-检测的操作方法,无需依赖自动进样器,并且无需弃培养液、离心等步骤,大大的简化了实验流程。3)无明显刺激性气味。

本试剂盒可用于多种常用细胞培养液:RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等,其半衰期均为2h左右(22℃),满足绝大多数高通量实验需求。

产品特色

信号稳定:半衰期长(达2h),非常适用于高通量检测。

操作简便:只需要加样-读值,即可完成实验。

兼容性好:可用于多种常用细胞培养液,如RPMI 1640、DMEM 、MEM-α、F12、DMEM/F12等。

存储条件

干冰运输。未拆封试剂盒-20℃保存,有效期1年。

溶解分装后的辉光型萤火虫萤光素酶底物于-70℃避光保存1年,或-20℃短期保存不超过1个月。

FAQ

Q:萤光素酶检测能用荧光显微镜吗?

A:不能。 需要带生物化学发光模块的仪器, 全波长 350-700 nm 检测。 如GloMaxTM20/20(单管检测),Biotex HTX  多功能酶标仪(配备自动进样器)。

Q:细胞裂解之后的裂解液能否在-80℃保存?

A:可保存在-80℃,基本与蛋白的保存方法类似。裂解后的样本可在 -80 ℃保存半年, -20 ℃保存一个月。

Q:荧光信号值太高该如何进行调整?

A:将裂解的样品进行稀释,或在转染实验后,减少细胞的孵育时间。


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已发表文献

[1] Zhou Z, Zheng X, Mei X, et al. Hsa_circ_0080229 upregulates the expression of murine double minute-2 (MDM2) and promotes glioma tumorigenesis and invasion via the miR-1827 sponging mechanism. Ann Transl Med. 2021;9(9):762. doi:10.21037/atm-20-7123(IF:3.932)

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