BspQI GMP-grade (10 U/μL)
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本产品为Ⅱ型限制性内切酶,来源于大肠杆菌表达的球形芽孢杆菌中BspQI基因编码的重组蛋白,识别序列为5’-GCTCTTCN1/N4-3’。用于消化质粒,制备多聚(A/T/G/C)末端线性化DNA片段,获得特异性的粘性末端。本产品按照GMP工艺要求生产,以液体形式提供。

产品特色

1. 完成 FDA DMF 认证 ((MF038306)

2. GMP级别、不含动物源成分,严格按照ISO13485 标准进行质量控制和生产,确保不引入动物源成分。

3. 酶切效率高、星号活性低。酶切效率高,37℃反应16小时无星号活性。

4. 卓越性能应用性能媲美竞品

应用案例

图1. Yeasen BspQI 更胜一筹。


在50 μL反应体系中,取1 μg λDNA,加入相应量的BspQI(50 ℃反应60 min,再80 ℃反应20 min,使BspQI失活),加入20 μL反应液。

M:DNA marker

C:未用BspQI处理的实验control组


存储条件

-25 ~ -15℃保存,有效期1年。

FAQ

Q: 模板线性化的酶切位点大多采用BspQI,bsaI,主要是因为什么原因呢?我看它们都属于IIS型限制性内切酶,这个具体有什么影响吗?

A: mRNA体外转录模板制备方面,限制性内切酶的选择主要基于以下因素:

①切口处应该是5´ 突出末端或者平末端。3´ 突出末端的存在会增加从模板体外转录(IVT)产生的假副产物;

②酶切位点识别序列尽可能长;识别序列越长,该序列出现在基因片段中的可能性就越小;

③IIS 型内切酶是用于疫苗开发中质粒线性化的首选酶,因为它们的切割位点在识别序列之外,可以确保所设计的 poly(A) 尾的完整性。使用 IIS 型内切酶线性化后的 DNA 模板上不会留下“疤痕”,IVT 过程中也不会添加不需要的核苷酸。

④内切酶符合医药生产级别要求(GMP,无动物源性成分等

目前大部分mRNA开发项目,特别是疫苗项目,质粒线性化的内切酶选择还是BspQI、BsaI、XbaI这三种,其中BspQI应用频率最高;估计和国外以往设计的质粒序列有一定关系;当然也不是只能选这些酶,我们也遇到过使用其他酶做线性化的。

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