Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit 细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒
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产品介绍

细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒用于快速便捷分离细胞/组织细胞膜和细胞浆蛋白,抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的蛋白,也包括线粒体膜、内质网膜以及高尔基体膜等上的膜蛋白。主要工作原理:通过匀浆适度破碎细胞,经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀,随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清,然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。整个过程仅需约90 min即可完成,抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE,Western、酶活性测定等后续实验。

膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等,后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定,但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。

按照说明书步骤的用量(细胞2-5×107个;组织约100 mg),20127ES50/20127ES60可分别进行50个和100个样品的抽提,具体用量可根据不同的样品体积进行调整。

      太阳成集团为您提供Western Blot实验整体解决方案,相关产品选购请参考:WB实验系列产品-选购指南
产品组分信息

组分编号组分名称20127ES50(50T)20127ES60(100T)
20127-AReagent A 试剂A50 mL100 mL
20127-BReagent B 试剂B15 mL30 mL


产品特色

1.即用型试剂,操作简单快捷。

2.能够分离不同细胞定位的蛋白。

存储条件

冰袋运输。-15~-25℃保存,有效期1年。

FAQ

Q:蛋白提取后保存方法和保存时间是多少?

A:在不被蛋白酶水解和细菌污染的条件下,提取的蛋白可于-80℃保存一年。

Q:蛋白抽提试剂盒适用对象?

A:目前我们的试剂盒只针对哺乳动物细胞和组织的提取,试剂盒中因不含去除细胞壁的成分,所有不能用于植物蛋白或细菌蛋白的提取。

Q:如何确保提取的细胞数量能够达到做EB 的标准?

A:一般 5X106 足矣,常规 WB 实验,每个上样孔要 105 个细胞,具体的也和靶细胞及提取的方式有关,如果提取的是膜蛋白或某细胞器内的蛋白,则应该增加细胞数。

Q:使用该抽提试剂盒得到的蛋白后续可以进行 WB 研究吗?

A:可以。除此之外,还可进行SDS-PAGE 和酶活性测定等后续实验。

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COA
已发表文献

[1] Song JW, Zhu J, Wu XX, et al. GOLPH3/CKAP4 promotes metastasis and tumorigenicity by enhancing the secretion of exosomal WNT3A in non-small-cell lung cancer. Cell Death Dis. 2021;12(11):976. Published 2021 Oct 21. doi:10.1038/s41419-021-04265-8(IF:8.469)

[2] Jiang H, Jin J, Duan Y, et al. Mitochondrial Uncoupling Coordinated With PDH Activation Safely Ameliorates Hyperglycemia via Promoting Glucose Oxidation. Diabetes. 2019;68(12):2197-2209. doi:10.2337/db19-0589(IF:7.199)

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[4] Wang Q, Wu ZL, Yuan X, et al. Bilobetin induces kidney injury by influencing cGMP-mediated AQP-2 trafficking and podocyte cell cycle arrest. Phytomedicine. 2019;64:153073. doi:10.1016/j.phymed.2019.153073(IF:4.180)

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