细胞膜/细胞浆蛋白抽提试剂盒用于快速便捷分离细胞/组织细胞膜和细胞浆蛋白,抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的蛋白,也包括线粒体膜、内质网膜以及高尔基体膜等上的膜蛋白。主要工作原理:通过匀浆适度破碎细胞,经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀,随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清,然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。整个过程仅需约90 min即可完成,抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE,Western、酶活性测定等后续实验。
膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等,后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定,但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。
按照说明书步骤的用量(细胞2-5×107个;组织约100 mg),20127ES50/20127ES60可分别进行50个和100个样品的抽提,具体用量可根据不同的样品体积进行调整。
太阳成集团为您提供Western Blot实验整体解决方案,相关产品选购请参考:WB实验系列产品-选购指南
产品组分信息
组分编号 | 组分名称 | 20127ES50(50T) | 20127ES60(100T) |
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20127-A | Reagent A 试剂A | 50 mL | 100 mL |
20127-B | Reagent B 试剂B | 15 mL | 30 mL |
1.即用型试剂,操作简单快捷。
2.能够分离不同细胞定位的蛋白。
冰袋运输。-15~-25℃保存,有效期1年。
Q:蛋白提取后保存方法和保存时间是多少?
A:在不被蛋白酶水解和细菌污染的条件下,提取的蛋白可于-80℃保存一年。
Q:蛋白抽提试剂盒适用对象?
A:目前我们的试剂盒只针对哺乳动物细胞和组织的提取,试剂盒中因不含去除细胞壁的成分,所有不能用于植物蛋白或细菌蛋白的提取。
Q:如何确保提取的细胞数量能够达到做EB 的标准?
A:一般 5X106 足矣,常规 WB 实验,每个上样孔要 105 个细胞,具体的也和靶细胞及提取的方式有关,如果提取的是膜蛋白或某细胞器内的蛋白,则应该增加细胞数。
Q:使用该抽提试剂盒得到的蛋白后续可以进行 WB 研究吗?
A:可以。除此之外,还可进行SDS-PAGE 和酶活性测定等后续实验。
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