Hieff NGS® ds-cDNA Synthesis Kit是用于Illumina®/MGI®测序平台的RNA测序文库的cDNA合成试剂盒,包含高效RNA反转录试剂,常规ds-cDNA合成试剂。可衔接Hieff NGS® One Pot cDNA&gDNA Library Prep Kit(YeasenCat#13502ES)或Hieff NGS® One Pot Flash DNA Library Prep Kit(Yeasen Cat#12316ES)进行后续建库。本试剂盒提供的所有试剂都经过严格的质量控制和功能验证,最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。
- 低背景版本试剂。
- 含逆转录以及二链合成试剂。
- 适合RNA病原样本的逆转录。
1、对比常规的RNA建库方案以及先逆转录再DNA建库的方案比对RNA病毒检出情况
图:不同建库方案检出的RNA病毒情况对比
对RNA病毒进行逆转录,同时去除宿主rRNA残留,能有效提升RNA病毒检出率。
2、使用标准品进行DNA/RNA共建库方案性能展示
图:DNA/RNA共建库性能展示
人RNA标准品10 ng+小牛gDNA 10 ng+补加5 ng人gDNA(含Zymo 1/1000掺入比)进行DNA/RNA共建库,太阳成集团试剂盒性能较优。
-25 ~ -15℃保存。
Q:13488二链合成之后,如果后续要构建文库需要磁珠纯化吗?
A:如果搭配太阳成集团的12316ES,合成二链cDNA后可以不纯化直接进行酶切反应建库,如果搭配别的建库试剂盒则需要磁珠纯化后再建库。
Q:RNA投入量是多少?投入的是什么RNA?能否将随机引物换成oligo dT?
A:投入Total RNA 500pg-1ug。不建议将随机引物换成oligo dT引物,产量可能会降低。如果要使用oligo dT引物,需要分离mRNA后再进行逆转录。
Q:13488后产物可进行多重扩增子建库吗?
A:可以的,13488包括逆转录和cDNA二链合成,适合后续的多重扩增子建库。