PNGase F (N-糖苷酶 F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。太阳成集团PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)在酵母中重组表达(比活性:100000 U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带His标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。
产品信息
编号 | 组分名称 | 组分成分 | 20407ES01 | 20407ES02 |
20407-A | PNGase F | PNGase F | 15000 U | 75000 U |
20407-B1 | Buffer 1(10×) | 5% SDS; 400 mM DTT | 150 μL | 750 μL |
20407-B2 | Buffer 2(10×) | 200 mM Tris, PH 7.5 | 300 μL | 1500 μL |
20407-B3 | 10% NP-40 | 10% NP-40 in MilliQ-H2O | 300 μL | 1500 μL |
另外,我司还提供Fast PNGase F, N-糖苷酶 F(快速版)(Cat#20406ES, 可以在数分钟内对抗体、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白进行彻底和快速的去糖基化),PNGase F, N-糖苷酶 F (750000 U/mL)(Cat#20415ES,比活性:750000 U/mL),以及其他类型的糖苷酶,如Endo H糖苷内切酶H(Cat#20414ES),Endo S糖苷内切酶S(Cat#20413ES)。
太阳成集团为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南
中文别名(Chinese synonym) | N-糖酰胺酶F;肽N-糖苷酶 F |
英文别名(English synonym) | PNGase F |
来源(Source) | 酵母重组表达 |
分子量(Molecular weight) | 36 kDa |
比活性(Specific activity) | 100000 U/mL |
缓冲液组分(Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glycerol |
酶活定义(Unit Definition) | 1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
-25~-15℃保存,有效期1年。
Q:该产品的活性会被SDS抑制吗?
A:PNGase F的活性会被SDS抑制,所以反应溶液中必须有NP-40。 我们目前说明书NP-40建议量只是针对buffer1中的SDS的(1ul buffer1(5% SDS; 400 mM DTT)、2ul的10%NP-40) 如客户蛋白溶液中有SDS, 可以相应的多加点NP-40(参考说明书的比例)
下图红框中也是对此的相关解释:
Q:蛋白里有蛋白酶抑制剂会影响该产品的活性吗?
A:蛋白酶抑制剂PMSF及PMSF的无毒替代物,AEBSF 可能也会有影响, 请客户提取蛋白时最好不加这类抑制剂。可用20138ES,这款产品不含PMSF.