碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，简写为ALP或AKP），又称碱性磷酸酯酶，是一组同工酶，目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织，是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解，从而将底物分子上的磷酸基团去除，转化为羟基。此类底物包括核酸（DNA、RNA）、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等；生物学中碱性磷酸酶（ALP）水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标，如：1）作为iPS成功诱导的标志；ALP在大多数细胞类型中均有表达，但是在iPS细胞内的表达水平明显升高；2）结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标；3）血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症，常被认为和恶性胆管阻塞，原发性硬化胆管炎，肝癌，肝硬化等肝胆疾病密切相关；4）血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成，以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关；5）碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况，多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说，血清内ALP的范围为40-150U/L。

对硝基苯磷酸（p-nitrophenyl phosphate, pNPP）是一种常用的磷酸酶显色底物，碱性条件下，可在ALP作用下生成对硝基苯酚（p-nitrophenol, pNP），后者在碱性环境下呈黄色产物，并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深，说明ALP活性越高，反之则活性越低。因此，通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。
产品组分

本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒，可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照，可进行达100个样品的检测。

冰袋运输。-20℃保存，一年有效。其中显色底物、pNP标准溶液需要避光保存。

Q：为什么该试剂盒检测不准？

A：可能是试剂盒各个成分没有恢复到室温即使用。

Q：在结果检测时 405nm 处测不到吸光值，怎么办？

A：如果不能测定 405nm，也可以在 400-415nm 范围内检测吸光度。如果不能立即测定，可以在数小时内完成测定，所显现的黄色在数小时（≤ 6h）内稳定。

Q：37℃孵育 5min，为什么检测不出来酶活？

A：建议延长孵育时间至 30min。

Q：该试剂盒中的产品可以直接在室温下操作的吗？

A：ALP 反应缓冲液和 p-nitrophenol 标准品溶液对人体有害，请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性，请小心操作。最好在通风橱里操作。

Q：该试剂盒按说明书检测完后如何计算酶活？

A：首先，绘制标曲：0.5mM*标准品的用量分别为4、8、16、24、32和40微升，用微摩尔数做横坐标，标曲方程可通过Excel做；然后，根据标准曲线及待检测样品的吸光度值，可以计算得到样品中p-nitrophenol生成量。再根据酶活性定义进行计算。即p-nitrophenol的微摩尔数除以孵育时间（min）。计算出的酶活单位用U表示。最后，样品的酶活浓度可以用酶活/（上样体积*蛋白浓度），最后可以表示成U/mg。