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巨噬细胞清除 | 第十课:大鼠体内巨噬细胞清除

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2026-05-26

前面我们已经介绍了巨噬细胞清除剂(Clodronate Liposomes)在小鼠体内不同部位巨噬细胞清除的应用示例,今天来分享使用巨噬细胞清除剂(Clodronate Liposomes)针对大鼠应用的相关文章及方法。

和小鼠一致,该氯磷酸盐脂质体用于大鼠体内巨噬细胞清除时同样是如下图所示的清除原理:氯膦酸盐包裹进磷脂体的水相中形成氯膦酸盐脂质体,氯膦酸盐不能自由的通过脂质体磷脂体双分子层,当注射到生物体内后,氯膦酸盐脂质体会被大鼠体内巨噬细胞吞噬,在巨噬细胞中溶酶体磷酸酶的作用下溶解在脂质体内的氯膦酸盐会被逐步释放并在巨噬细胞细胞内积累,当达到一定浓度时,巨噬细胞将会受到不可逆损伤,诱发细胞凋亡,随后细胞内的氯膦酸盐会被释放到细胞外,游离的氯磷酸盐半衰期很短,可随尿液排出体外。

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文献一

文章来源:

Macrophage depletion in inflamed rat knees prevents the activation of synovial mesenchymal stem cells by weakening Nampt and Spp1 signaling. 

Inflamm Regen.(IF=6.6,Q1)

该文献是氯膦酸脂质体(Clodronate Liposomes)在大鼠炎症膝关节模型中的应用。

巨噬细胞清除方法:

实验选用10周龄雄性Lewis大鼠,使用角叉菜胶(carrageenan)诱导急性膝关节滑膜炎模型。巨噬细胞清除时采用关节内注射 50μl(0.1mg)Clodronate Liposomes,3天注射1次,共注射2次,对照组注射空白脂质体。

清除效果:

结果表明,通过免疫组化和流式检测CD68发现注射氯膦酸盐脂质体显著减少巨噬细胞数量,无论是正常还是模型膝关节中氯磷酸盐都能够有效清除CD68+巨噬细胞,在模型中的膝关节样本中清除巨噬细胞的同时并不改变M1(CD80/CD86)/M2(CD206)型的比例。

文献二

文章来源:

Mussel inspired 3D elastomer enabled rapid calvarial bone regeneration through recruiting more osteoprogenitors from the dura mater. 

Regen Biomater. (IF=8.1,Q1)

该文献是氯膦酸脂质体(Clodronate Liposomes)在大鼠颅骨缺损模型中清除巨噬细胞的应用。

巨噬细胞清除方法:

实验选用4周龄雄性SD大鼠研究人员建立了大鼠8mm颅骨缺损模型,并将实验组分为两组进行对比:

实验组(C15G85-PDA + Clodronate): 接受氯膦酸盐脂质体(Clodronate liposomes)局部注射,以耗竭巨噬细胞。

对照组(C15G85-PDA + PBS): 接受PBS脂质体(PBS liposomes)局部注射,作为对照。

缺损区域局部给药50 μL(0.1mg),支架植入后前2周每2天注射1次,2周后每周注射1次直至取样。

清除效果:

如下为支架植入后2周取材通过免疫荧光结果可见CD206+M2 型巨噬细胞在注射了氯膦酸盐脂质体样本中有明显清除效果。

文献三

文章来源:

Ribeiro-Machado C,Santos SG,Amaral IA, et al. Macrophage-based therapy for intervertebral disc herniation: preclinical proof-of-concept.

NPJ Regen Med. (IF=6.5,Q1)

该文献是氯膦酸脂质体(Clodronate Liposomes)在大鼠椎间盘突出模型的应用。

巨噬细胞清除方法:

采用2–3月龄雄性Lewis(LEW/Crl)大鼠构建尾椎椎间盘突出模型(rat caudal IVD herniation model)采用经皮穿刺针刺破尾椎椎间盘(Co5/6、Co6/7、Co7/8),诱导纤维环破裂、髓核突出,模拟临床椎间盘突出,明确巨噬细胞对椎间盘突出自发回退的必要性。

巨噬细胞清除时采用尾静脉注射Clodronate Liposomes,注射剂量为100 μL / 10 g。CLP2w组造模当天开始,每3天注射1次,持续至术后2周;CLP6w组:术后2周开始,每5天注射1次,持续至术后6周,对照组注射空白脂质体。所有动物均在术后6周取材检测。

清除效果:

通过流式结果显示,在外周血(图b)与脾脏(图c)中巨噬细胞被显著清除:CD172+CD11b/c+ 髓系细胞(myeloid cells)阳性率在CLP2W及CLP6W中相比对照组显著下降。

文献四

文章来源:

Macrophage depletion in stellate ganglia alleviates cardiac sympathetic overactivation and ventricular arrhythmogenesis by attenuating neuroinflammation in heart failure.

 Basic Res Cardiol.(IF=8.1,Q1)

该文献是氯膦酸脂质体(Clodronate Liposomes)在大鼠颅骨缺损模型中清除巨噬细胞的应用。

巨噬细胞清除方法:

实验选用雄性SD大鼠(6–7周龄,180–200 g)构建的心肌梗死(MI)诱导的慢性心力衰竭模型,开胸结扎左前降支冠状动脉。

巨噬细胞清除时采用双侧星状神经节(SG)局部微量注射Clodronate Liposomes,每侧注射40 μg,双侧共80 μg,造模后12周处于心衰稳定期进行单次注射,注射1周后取材,对照组注射空白脂质体。

清除效果:

如下流式检测结果显示,注射氯磷酸盐脂质体后因心衰引起的星状神经节内巨噬细胞增加有所缓解,相比空白脂质体CD11b+CD45+巨噬细胞显著减少。

文献五

文章来源:

夏良君,崔础婷,李军威,程洁,夏有兵。两种方法清除大鼠子宫内膜巨噬细胞的比较研究 [J]. 中国比较医学杂志,2024, 34 (4): 84-91.

DOI:10.3969/j.issn.1671-7856.2024.04.010

该文献是氯膦酸脂质体(Clodronate Liposomes)在大鼠颅骨缺损模型中清除巨噬细胞的应用。

巨噬细胞清除方法:

正常雌性SD大鼠(8周龄)

单侧对照组:左侧宫腔注射PBS脂质体100 μL

单侧清除组:右侧宫腔注射氯膦酸脂质体100 μL

双侧对照组:双侧宫腔各注射PBS脂质体100 μL

双侧清除组:双侧宫腔各注射氯膦酸脂质体100 μL

全身对照组:尾静脉注射PBS脂质体500 μL

全身清除组:尾静脉注射氯膦酸脂质体500 μL

共6组,每组8只,注射后48h取材。

清除效果:

如组化(CB68)及流式(CD68+CD45)结果所示:双侧宫腔注射对子宫内膜巨噬细胞的清除效率显著高于尾静脉注射,且不影响卵巢巨噬细胞,是建立子宫局部特异性巨噬细胞清除模型的最优方法。

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货号

产品名称

规格

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Clodronate Liposomes 体内巨噬细胞清除剂

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