环状 RNA (circRNA)是一类单链闭合的环状RNA分子，与线性mRNA相比，circRNA具有稳定性高、免疫原性低、表达持久等优势，已经成为下一代RNA疗法赛道的新秀。将IVT得到的线性RNA进行环化是circRNA人工合成的关键环节，常用的环化策略包括Ⅰ型内含子自剪切、Ⅱ型内含子自剪切和T4 RNA连接酶策略。连接酶策略中最常用的便是T4 RNA Ligase 1。

图1. T4 RNA Ligase 1环化机理

太阳成集团T4 RNA Ligase 1

T4 RNA Ligase 1是一种ATP依赖型连接酶，可以催化单链RNA、单链DNA、单核苷酸分子间或分子内的5'-P末端与3'-OH末端之间形成磷酸二酯键。太阳成集团的T4 RNA Ligase 1由大肠杆菌重组表达，连接效率高，核酸酶残留水平低，可用于RNA与RNA分子间连接/分子内连接（RNA环化）、miRNA文库构建中的5'端接头的连接、5'-RACE (cDNA末端快速扩增)中将寡核苷酸连接到单链cDNA中等应用。

图2. T4 RNA Ligase 1连接类型示意图

性能展示

1、切口酶残留显著低于进口品牌N*

图3. 切口酶残留检测

将30 U太阳成集团及进口品牌N*的T4 RNA Ligase 1与底物DNA孵育，琼脂糖凝胶电泳比较DNA谱带变化。结果显示太阳成集团3个批次的T4 RNA Ligase 1切口酶残留显著低于进口品牌N*。

2、无核酸外切酶残留

图4. 外切酶残留检测

3、无RNase残留

图5. RNase残留检测

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产品定位	产品名称	货号
RNA环化	T4 RNA Ligase 1	14651ES
RNA纯化	RNase R (20 U/μL)	14606ES
质粒线性化	BspQI GMP-grade（10 U/μL）	10664ES
质粒线性化	Bsa I GMP-grade	10661ES
模板去除	DNase I GMP-grade	10611ES
体外转录	T7 RNA Polymerase GMP-grade (50 U/μL)	10624ES
	Pyrophosphatase,Inorganic GMP-grade	10620ES
	Murine RNase inhibitor GMP-grade	10621ES
	mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-grade	10614ES
	mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase GMP-grade	10612ES