——Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR

常见的gDNA消化去除通常在正式反转录步骤之前，加入gDNA消化去除组分后，需在特定温度下反应一段时间，反应冷却后再加入相关的反转录组分进行反转录，步骤多且耗时通常在半小时左右。

小翌今天给大家带来一款快速反转录预混液，gDNA去除和反转录一步完成，且只要5分钟，“咻”的一下，就可拿到想要的cDNA啦！

在检测基因表达水平时，RNA样品中的基因组DNA(gDNA)残留是一个潜在的风险。gDNA可能会与目的RNA共同扩增，从而产生假阳性的现象，例如Ct值偏小、Ct值波动以及熔解曲线双峰。

Ct值偏小/Ct值波动

▲ Ct值偏小/Ct值波动

如何避免RNA中残留的gDNA带来的干扰呢？通常情况下，我们可以选用带gDNA去除的RNA提取试剂获取高质量的RNA或是针对提取的RNA在反转录时进行gDNA消化去除处理。

产品名称

Hifair^® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR(Cat #11151ES)

产品特点

一步完成：一步完成gDNA去除和反转录；
快速反应：消化&反转仅需5分钟；
高效合成：可保证100 pg RNA反转录；
产物稳定：cDNA产物可长久稳定保存。

产品性能

反转录产量高

293T细胞RNA反转录试剂测试结果

293T细胞RNA反转录试剂测试ct平均值

图. 以人293T细胞RNA为模板，分别检测三种基因。品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反转录的产量均优于其他品牌，Ct值更小。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)

拟南芥RNA反转录测试结果

拟南芥RNA反转录测试ct平均值

图. 以拟南芥RNA为模板，品牌A、品牌B、品牌C均为一步gDNA去除&反转录试剂。测试结果显示，在1 μg和10 ng Total RNA 投入下，11151ES反转录的产量均优于其他品牌，Ct值更小。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)

优异的灵敏度

扩增30%GC 扩增50%GC

扩增60%GC 扩增70%GC

图. 以人293T细胞RNA为模板，扩增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分别投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA进行反转录并进行荧光定量检测。结果显示，11151ES可满足100 pg-1 μg RNA的反转录。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)

cDNA产物稳定性好

293T细胞RNA反转录

图.以人293T细胞RNA为模板进行反转录，将获得的cDNA产物进行反复冻融，分别冻融10次、20次、30次。测试结果显示11151ES反转录得到的cDNA产物在30次反复冻融处理后，仍保持高度的稳定性，Ct值差异不大。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)

293T细胞RNA为模板进行反转录

图. 以人293T细胞RNA为模板进行反转录，将获得的cDNA产物在-20℃、4℃、25℃和37℃的温度条件下放置7天。测试结果显示11151ES反转录得到的cDNA产物在不同温度下存储7天，仍保持高度的稳定性，Ct值差异不大。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)

试剂盒稳定性好

293T细胞RNA反转录

293T细胞RNA反转录

图. 以人293T细胞RNA为模板，将分别在-20℃、4℃和37℃的温度条件下放置3天和7天的试剂盒进行反转录。测试结果显示不同温度不同时间放置下的11151ES反转录结果差异不大，试剂盒具有良好的稳定性。(配套测试用荧光定量试剂为11184ES)

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