海量质粒和PCR产物，不想靠双手硬抗？看这里
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2026-05-29
全球质粒DNA制造市场规模2025年已达约283亿元人民币，研究级质粒DNA制造市场更以9.8%的年复合增长率飞速扩张。全球已上市基因治疗产品达27款，AAV基因治疗市场CAGRs高达18.5%。数量极为庞大的质粒及PCR产物，正把越来越多的实验室推入“人肉高通量”的困境中。
质粒应用场景丰富多样
▶️ 基因克隆：获取大量目标基因；基因库构建；基因序列分析
▶️ 基因表达：蛋白质生产；功能研究
▶️ 遗传工程：基因编辑；基因治疗；转基因生物
▶️ 基因调控研究：启动子分析；转录因子研究；信号通路研究
▶️ 生物制药：药物开发；疫苗制备；基因治疗药物
▶️ 教育和科研工具：教学实验；科研工具
质粒构建中，提到PCR产物，曾经在实验室深夜熬夜做连接转化的你，是不是还有点头皮发麻？PCR产物纯化、酶切、回收、连接、转化、挑克隆、摇菌……一步都不能错，一步都不能停。好不容易跑完胶回收完片段，发现还得做大批量浓度测定，逐个上机、逐个记录、逐个归一化——光这一项，一个96孔板忙活一下午是常事。
而质粒提取，更是让人想摔移液器的存在。大通量下，每次加液离心加液离心，动作重复到机械。偏偏质粒抽提还得避开蛋白污染、RNA污染——低浓度质粒反复浓缩管用多了回收率低，离心管一多又容易拿错位置。一天做下来，手臂酸胀、眼神涣散，PCR产物质粒构建更是愁上加愁。全球数百万生命科学研究者，正在付出相似的时间成本和体力消耗。
既然高通量时代已经到来，为何实验室的管理和操作还要停留在“手工作坊”模式下？面对数千万级的样本通量及高通量实验质控需求，传统手工流程效率低、出错风险高、难以批次一致——亟需标准化、自动化的全流程解决方案。
面对现实吧：你已经和这些痛点周旋太久了。
这些痛点，其实都可以靠一套科学完整的解决方案来化解。太阳成集团特别为质粒、PCR产物的大量处理开发了高通量提取、浓度测定与测序的全套体系。
▶️ 高通量提取：优化多种样本提取流程，适配自动化和96孔板操作，质粒DNA与PCR产物回收效率稳定可靠，让大通量制备不再挤占宝贵的实验时间。
▶️ 批量浓度测定：搭配经过优化的快速测定流程与清晰的记录模板，轻松完成几十上百个样品的一次性均匀上机读取，实现浓度自动记录，数据清晰可追溯。
▶️ 测序完整解决方案：从扩增、提取、浓度归一化到测序反应构建，每一步都经过测试与验证，有效降低手工误差，提高测序质量与成功率，让后续分析顺利落地。
1. 质粒自动化提取以及浓度测定
分别使用5 mL、10 mL、20 mL菌液进行质粒提取，质粒提取试剂盒18549ES搭配自动化提取设备80510ES进行质粒提取。提取得到的质粒进行浓度测定80576ES和琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示，搭配自动化提取，不同体积的样本均能得到较高的产量和较好的完整性。
图：琼脂糖凝胶电泳检测提取得到的质粒质量
2. 全长质粒测序（ONT以及Cyclone平台，片段化酶VS转座酶方案）
2.1 片段化酶方案
投入5~50 ng的质粒使用片段化酶方案13305ES进行质粒建库，在ONT平台进行测序，结果显示，不同投入量不同长度的质粒，在同样的实验条件，均能得到较好的全长质粒测序结果。
图：ONT平台，5 ng和50 ng不同长度质粒进行全长测序的片段分布图
2.2 转座酶方案
使用转座酶方案对PUC19质粒进行三代纳米孔全长文库构建，最后使用Cyclone平台测序，最后结果显示，转座酶方案进行全质粒测序，片段更集中。
图：Cyclone平台转座酶方案构建全长质粒文库的数据以及片段分布图
3. 质粒和PCR产物同源重组结果
分别用长度为72 bp~3000 bp长度的PCR产物与质粒进行同源重组10911ES，转化到大肠杆菌中，在LB平板上进行涂布，检测平板上单菌落的生长情况。结果显示，不同长度的PCR产物，均能形成有效的重组质粒。
4. 质粒DNA残留检测结果展示
使用质粒DNA残留检测试剂盒搭配不同的qPCR仪进行质粒DNA残留检测，结果显示，本试剂盒在不同的qPCR仪设备以及不同样本间检测，一致性较高，符合《生物制品质量控制分析方法验证技术评审一般原则》的要求。
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实验步骤 |
产品名称 |
产品货号 |
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质粒提取 |
磁珠法质粒小量提取 |
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磁珠法质粒去内毒素中量提取 |
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无内毒素质粒大量提取 |
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96通道自动化核酸提取仪AP-96N |
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浓度测定 |
dsDNA BR Assay Kit/ BR 双链DNA定量检测试剂 |
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核酸定量仪荧光计Qubit（96通道升级版） |
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同源重组质粒构建 |
Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit |
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质粒DNA残留检测 |
Plasmid DNA Residue Detection Kit |
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质粒测序 |
Hieff NGS® PreMix Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina转座酶法建库试剂盒（二代质粒测序） |
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Hieff® LongSeq Plasmid Fragmentation and Ligation Module（三代全长质粒建库） |
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转座酶裸酶（包埋序列可定制） |
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三代转座酶建库（不同测序平台试剂不一样） |
详询 |
